在实际操作过程中，首先需要将待测样本加入到预先包被有捕获抗体的微孔板中进行孵育。随后，加入带有标记物（如酶）的检测抗体，使其与目标抗原形成“夹心”结构。接下来，通过添加底物溶液引发化学反应，根据颜色变化或荧光信号强度的变化来定量分析目标物质的浓度。这种方法不仅具有较高的灵敏度和特异性，而且能够同时处理大量样品，极大地提高了工作效率。
此外，在实验设计时还需注意选择合适的抗体组合以及优化反应条件，以确保结果的准确性和可靠性。例如，合理控制孵育时间和温度可以有效减少非特异性结合现象的发生；而适当调整抗体浓度则有助于提高检测限并降低背景噪音。总之，“酶联免疫吸附试验双抗体夹心法”以其独特的优势成为了众多科研工作者不可或缺的重要工具之一。
